Анализ транскриптомов свободноживущих Escherichia coli K-12 MG1655 и клеток в составе биоплёнок
Казнадзей А.Д.1,2, Дахновец А.И.3, Бессонова Т.А.1,2,4, Тутукина М.Н.1,2,4
1Институт проблем передачи информации им А.А. Харкевича РАН, Москва, Россия
2Институт общей генетики им Н.И. Вавилова РАН, Москва, Россия
3Сколковский институт науки и технологий, Москва, Россия
4Институт биофизики клетки РАН – обособленное подразделение ФИЦ ПНЦБИ РАН, Пущино, Московская область, Россия
Аннотация. Формирование клетками биоплёнок может создавать множество проблем – их образование патогенными штаммами Escherichia coli приводит к развитию хронических заболеваний мочеполового тракта и гастроэнтеритов, трудно поддающихся лечению антибиотиками. Несмотря на это, ключевые регуляторы и сигналы, приводящие к переходу клеток E. coli от свободноживущего состояния к прикреплению к поверхности и формированию биоплёнок, еще до конца не изучены. В этой работе был проведен сравнительный анализ транскриптомов клеток E. coli K-12 MG1655, растущих в стандартных лабораторных условиях и в условиях, приближенных к условиям внутри организма хозяина. Было показано, что при переходе клеток от свободноживущего состояния к биоплёнкам происходит существенная перестройка их углеводного метаболизма и подтверждена важная роль метаболизма гексуронатов в этом процессе. Кроме того, была обнаружена суперэкспрессия малой 6S РНК SsrS. Была проанализирована дифференциальная экспрессия генов E. coli K-12 MG1655, находящихся в составе биоплёнок, при удалении гена одного из регуляторов метаболизма гексуронатов, YjjM (LgoR). В ходе работы был оптимизирован алгоритм анализа данных, позволяющий находить и отрезать адапторы, пришитые случайным образом. Полученные результаты однозначно свидетельствуют о ключевой роли малых регуляторных РНК, в том числе, SsrS, а также белка YjjM в формировании биоплёнок E. coli K-12. Кроме того, было обнаружено, что YjjM, по-видимому, может регулировать процессы биосинтеза белка, стабилизации мРНК и антифаговой защиты бактерий, что требует дальнейшего исследования.
Ключевые слова: Escherichia coli, биоплёнка, транскриптом, YjjM, галактуронат, регуляторные РНК, SsrS.